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细胞系错误辨识/错误鉴定的根源!日期:2023-12-11


细胞培养通常被认为是一种需要较少技能和必要设备的技术,例如细胞间通常是共用的、超净工作台和培养箱可以不受限制地使用,正是在这种情况下,尝试建立新细胞系时往往就会发生交叉污染。被提交到德国微生物和细胞培养物保藏中心 ( German Collection of Microorganisms and CellCulture, DSMZ)的550个白血病和淋巴瘤细胞系中, 59/395(15%)的原始来源细胞系以及23/155(15%)的二次来源细胞系(如实验室间交换的细胞)是错误的。

有许多因素会导致细胞系错误辨识/错误鉴定,每个实验室都会存在风险。细胞系错误辨识/错误鉴定最直接的原因或许就是在细胞培养的常规操作过程中对培养皿/培养瓶进行了错误标记。出现这种问题的原因有:实验员的工作量超负荷、细胞培养操作过程中注意力不集中等。
细胞系交叉污染以及随后污染细胞系的过量生长是引起细胞系错误辨识/错误鉴定的另一个常见原因。试剂的共用、更换培养基时反复使用相同的移液管等因素都会大大增加细胞系发生交叉污染的几率。当交叉污染发生时,在经历4-5次传代后,污染细胞系会迅速生长并超过真正在培养的细胞系,一个纯的污染细胞系将会形成。

异种移植也会导致细胞系交叉污染和错误辨识/错误鉴定,来自异种移植的复苏细胞会被宿主动物的细胞所替代。
一般而言,交叉污染的最终结果就是真正的细胞系完全且快速地被替代。两个细胞系不能持续共存于同一个培养环境,除非它们是共生关系,但这种情况还未曾报道过。因此,细胞混合物很少被发现。已知的唯一情况是,一个细胞群体在多次传代后、经体细胞杂交后含有稳定的基因组混合物。

相应的质控措施能够阻止或减少细胞系错误辨识/错误鉴定的发生。STR鉴定作为细胞身份确认的金标准方法便是相关质控措施中的重要一环。不过,由于缺乏重视,细胞系错误辨识/错误鉴定的现象仍然十分普遍。

参考文献:
1.www.jsdna.org/cell
2.http://www.jsdna.org/mobile/information/xuz
3.American Type Culture Collection Standards Development Organization Workgroup ASN-0002. Cell line misidentification: the beginning of the end. Nat Rev Cancer. 2010 Jun;10(6):441-8.
苏州鉴达(Genetic Testing Biotechnology, GTB)采用STR分型技术,针对人源细胞21个基因座、小鼠源细胞19个基因座(18个小鼠源基因座+1个人源基因座TH01)进行检测,3130XL型遗传分析仪进行毛细管电泳,与DSMZ、Cellosaurus、ATCC等数据库进行比对,出具权威英文报告,为全国近500家科研机构(高校、研究所、医院、公司)提供高质量服务,多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊(如Clinical Cancer Research、Nature Commnications、Int J Cancer等)发表论文。如需了解更多鉴达生物(Genetic Testing Biotechnology, GTB)相关细胞株鉴定信息,可扫码关注官方公众号。将本文转发至朋友圈(至少保留)。添加微信或QQ客服后,将朋友圈截图发给微信或QQ客服,并备注单位及课题组(示例:XX大学XX课题组)。后期可有两次机会享七五折优惠,原价1200元/株。微信:18112556907、QQ:2791427499
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