结直肠癌（CRC）作为全球常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率居高不下。尽管近年来靶向治疗与免疫治疗取得了长足进步，但复发和转移仍是导致患者死亡的主要原因。寻找新的分子标志物和治疗靶点，对于改善患者预后具有重要意义。

2023年12月，复旦大学附属中山医院研究团队在《Cancer Letters》期刊（2023, 578: 216460）发表了题为《Coiled-coil domain-containing 154 promotes colorectal cancer proliferation and metastasis via interacting with minichromosome maintenance complex component 2》”的研究论文。该研究首次系统评估了卷曲螺旋结构域（CCDC）蛋白家族在结直肠癌中的临床价值，并深入揭示了CCDC154通过与MCM2相互作用促进肿瘤增殖与转移的分子机制，为结直肠癌的诊断与治疗提供了新的潜在靶点。

研究背景：CCDC蛋白家族在肿瘤中的未知角色

卷曲螺旋结构域（Coiled-coil domain，CCD）是一种由两到多个右手α螺旋相互缠绕形成的左手超螺旋结构，广泛存在于约10%的蛋白质序列中。CCDC蛋白家族成员众多，可发挥结构蛋白、调节蛋白、DNA结合蛋白等多种功能，参与细胞骨架组装、信号转导、基因表达调控等重要生物学过程。

近年来，越来越多的证据表明，CCDC家族成员在多种恶性肿瘤中发挥关键作用。例如，CCDC50是肝细胞癌的诊断和预后标志物，CCDC3通过结合p53和MDM2抑制乳腺癌生长，CCDC124在食管癌、子宫内膜癌等多种肿瘤中高表达。然而，CCDC蛋白在结直肠癌中的表达模式、临床意义及生物学功能，此前尚缺乏系统性的研究。

核心发现：CCDC154是结直肠癌中关键促癌因子

研究团队首先利用TCGA数据库中的结直肠癌数据集（TCGA-COADREAD），系统分析了36个CCDC家族成员的表达谱与临床相关性。通过差异表达分析、随机森林算法和LASSO回归，筛选出5个具有预后价值的CCDC基因（CCDC85A、CCDC79、CCDC154、CCDC68、CCDC113），并建立了基于这些基因的CCDC评分模型。该模型能够有效区分结直肠癌患者的总生存期（HR=1.91, p<0.001）。

在五个候选基因中，CCDC154表现出最强的预后相关性（p=0.003），且其高表达与较差的总生存期、疾病特异性生存期和无进展间隔显著相关。基于此，研究团队将CCDC154确定为后续功能机制研究的核心分子。

表达与临床意义：CCDC154高表达预示不良预后

为进一步验证CCDC154的临床价值，研究团队在119例结直肠癌患者的组织芯片中进行了免疫组化染色。结果显示：

1】CCDC154在结直肠癌组织中显著高表达，与配对癌旁组织相比差异明显（p<0.05）；

2】ROC曲线分析显示，CCDC154具有较好的诊断价值（AUC=0.751）；

3】Kaplan-Meier生存分析表明，CCDC154高表达患者的总体生存期显著缩短（log-rank p=0.019）；

4】多因素Cox回归分析进一步确认，CCDC154高表达是结直肠癌患者的独立预后危险因素（HR=2.138, 95% CI 1.114–4.105, p=0.022）。

功能验证：CCDC154促进结直肠癌增殖与转移

研究团队在多种结直肠癌细胞系（SW480、SW620、HCT116、RKO等）中检测了CCDC154的基线表达水平，并利用慢病毒介导的shRNA技术在HCT116和RKO细胞中稳定敲低CCDC154。功能实验结果显示：

1】细胞增殖能力显著下降：MTT实验和克隆形成实验均证实，CCDC154敲低后细胞增殖受抑（p<0.001）；

2】细胞凋亡比例增加：流式细胞术显示，CCDC154敲低组凋亡率明显升高；

3】迁移和侵袭能力减弱：Transwell实验表明，CCDC154敲低后细胞迁移和侵袭能力均显著下降；

4】体内成瘤能力减弱：在裸鼠皮下移植瘤模型中，CCDC154敲低组肿瘤体积和重量均显著小于对照组（p<0.001）。

值得一提的是，本研究中所使用的结直肠癌细胞系（包括SW480、SW620、HCT116、RKO等）均由苏州鉴达生物科技有限公司（Genetic Testing Biotechnology）完成细胞系鉴定，确保了实验材料的可靠性和可重复性，为研究结果的科学性提供了坚实基础。

机制探索：CCDC154与MCM2相互作用驱动恶性表型

为阐明CCDC154的分子作用机制，研究团队采用免疫共沉淀结合液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术，在RKO细胞中筛选与CCDC154相互作用的蛋白。结果发现，MCM2（微小染色体维持复合物组分2）是CCDC154的关键相互作用蛋白。

MCM2是真核生物DNA复制起始与延伸的核心调控因子，在增殖细胞中高表达，是反映细胞增殖活性的敏感指标。进一步的验证实验表明：

1】CCDC154与MCM2存在直接相互作用：co-IP实验证实两者在细胞内结合；

2】CCDC154敲低导致MCM2表达下调；

3】MCM2过表达可部分逆转CCDC154敲低所导致的增殖和迁移抑制，提示CCDC154通过MCM2发挥促癌作用。

免疫微环境：CCDC154高表达与CD8⁺ T细胞浸润负相关

肿瘤免疫微环境在结直肠癌进展中发挥重要作用。研究团队通过CIBERSORT和ssGSEA算法分析发现，CCDC154高表达与CD8⁺ T细胞浸润减少、中性粒细胞浸润增加显著相关。免疫组化验证进一步证实了这一关联（Spearman r = -0.52 和 0.54，均p<0.01）。

此外，CCDC154高表达组中多个免疫检查点基因（如ADORA2A、CD40、CD47等）和HLA家族基因的表达也发生了显著变化，提示CCDC154可能通过影响肿瘤免疫微环境，促进肿瘤的免疫逃逸。

临床相关性：CCDC154/MCM2/Ki-67/p53共表达网络

研究团队对结直肠癌组织切片进行了CCDC154、MCM2、Ki-67和p53的连续切片免疫组化染色，并进行了相关性分析。结果显示：

1】CCDC154与MCM2表达呈正相关（Spearman r=0.577, p<0.001）；

2】CCDC154与Ki-67表达呈正相关（Spearman r=0.492, p<0.001）；

3】CCDC154与p53表达呈负相关（Spearman r=-0.521, p<0.001）。

这些结果表明，CCDC154可能通过调控细胞增殖相关分子网络，参与结直肠癌的发生与进展。

研究意义与展望

本研究首次系统揭示了CCDC蛋白家族在结直肠癌中的表达特征与临床意义，并深入阐明了CCDC154通过结合MCM2促进肿瘤增殖与转移的分子机制，具有以下重要意义：

新标志物发现：CCDC154可作为结直肠癌独立预后标志物，具有临床转化潜力；

新机制解析：CCDC154与MCM2的相互作用为结直肠癌增殖调控提供了新的分子通路；

新靶点提示：靶向CCDC154/MCM2轴可能成为结直肠癌治疗的新策略；

免疫微环境关联：CCDC154与CD8⁺ T细胞浸润的负相关，提示其可能影响免疫治疗疗效。

当然，本研究也存在一定局限性：CCDC154与MCM2相互作用的具体结构域、调控细节及上下游信号通路仍需进一步探索；CCDC154在结直肠癌中的功能是否受翻译后修饰调控，也值得深入研究。

未来，随着对CCDC154功能网络的深入解析，以及基于CCDC154的靶向干预策略的开发，有望为结直肠癌患者提供新的精准诊疗方案。

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